Page 15

Enero 2017

ARTÍCULO DE INVESTIGACIÓN 11 Efectos de CuSO4 en daño pulmonar de ratas expuestas a ozono - M. J. Oyarzún et al aorta abdominal, 24 h después de la instilación intratraqueal de CuSO4. Los pulmones fueron extraídos, pesados y degasificados en cámara de vacío (-100 mmHg). En el pulmón izquierdo se efectuó estudio histopatológico y en el derecho lavado broncoalveolar (LBA). Este lavado se efectuó a través de una cánula en el bronquio fuente derecho, inyectando NaCl al 0,9% a 4ºC hasta alcanzar la capacidad pulmonar total. El lavado se repitió 4 veces, recuperándose en todas las series aproximadamente el 85% del volumen inyectado. La mezcla de los 4 lavados se centrifugó (102 g por 10 min a 4ºC) y en el sobrenadante se determinó proteínas totales16, fosfatasa alcalina17 y g glutamil transpeptidasa (GGT)18. El recuento total de células del LBA se realizó en cámara de Neubauer y el recuento diferencial en frotis del pellet fijado en metanol y teñido con Giemsa19. En una muestra de plasma se determinó F2 isoprostano20. Para el estudio histopatológico se insufló el pulmón con presión de 25 cm de H2O en vías aéreas21, fijándolo con formalina al 10% tamponada y se hicieron tinciones de hematoxilina-eosina y tricrómica de Masson. El estudio fue realizado por el patólogo (SGB), sin conocer el tratamiento recibido por cada especimen. El grado de inflamación fue evaluado con puntaje de 0 a 4 (0: ausente, 1: leve, 2: moderada, 3: intensa y 4: muy intensa)22. La presencia de macrófagos se evaluó con puntaje de 0 a 3 (0: ausente, 1: escasa, 2: moderada y 3: abundante). El grado de fibrosis se evaluó con la tinción tricrómica de Masson utilizando un puntaje de 0 a 3 (0: ausente, 1: escasa, 2: moderada y 3: intensa)22. Los resultados de las determinaciones bioquímicas se analizaron usando ANOVA y la prueba de Newman-Keuls. Los puntajes histopatológicos fueron analizados utilizando las pruebas de Kruskal-Wallis y de Dunnet. La frecuencia de bronconeumonía, macrófagos vacuolados y pigmentados se comparó con el test exacto de Fisher. Se consideró estadísticamente significativo un valor de p ≤ 0,05. Resultados Análisis del lavado broncoalveolar (LBA) El recuento total de células del LBA, expresado en número de células por mL o por 100 g de peso corporal, mostró aumento significativo (p < 0,05) de células totales en las series ozono + CuSO4, aire + CuSO4 y en la serie ozono comparado con las series controles. No hubo diferencia significativa entre las series ozono + CuSO4, aire + CuSO4 u ozono (Tabla 1). En el recuento diferencial de células predominaron los macrófagos (52,9 a 58,4%), tanto en las series control como en las expuestas a ozono, en tanto que en las series con CuSO4 expuestas a aire u ozono predominaron los neutrófilos (49,4 a 56%) (Tabla 1). Las proteínas totales del LBA aumentaron significativamente en las mismas series en que hubo un aumento significativo de las células totales: ozono + CuSO4, aire + CuSO4 y ozono (Tabla 2). La actividad de la γ glutamil-transpeptidasa (GGT) aumentó significativamente solo en las series instiladas con CuSO4 (Tabla 2). La actividad de fosfatasa alcalina en el LBA aumentó significativamente en las series ozono Tabla 1. Recuento total y diferencial de células en el lavado broncoalveolar luego de la exposición crónica intermitente a 0,5 ppm O3 seguida de instilación endotraqueal de sulfato cúprico Células Aire (n = 7) Aire + NaCl (n = 6) O3 (n = 7) O3 + NaCl (n = 7) Aire+CuSO4 (n = 7) O3 + CuSO4 (n = 7) Céls 104/ml 23,4 ± 2,75 18,6 ± 2,3 33,4 ± 3,5* 24,6 ± 3,1 33,4 ± 8,4* 36,9 ± 7,3* Céls 104/100 g 210,7 ± 30,3 160 ± 22,4 297,5 ± 39* 234,6 ± 35,4 320,8 ± 72,9* 333,9 ± 72,2* Macrófagos % 52,9 ± 21 55,8 ± 13,6 54 ± 18,2 58,4 ± 5,7 43,6 ± 18,3 46,7 ± 13,2 Neutrófilos % 44,7 ± 22,2 35,8 ± 17,5 45 ± 18 41,6 ± 5,7 56 ± 18,6 49,4 ± 16,2 Linfocitos % 2,4 ± 3,0 8,3 ± 12,7 3,7 ± 5,4 0-0 0,4 ± 0,5 3,9 ± 4 *p < 0,05 ANOVA y Newman Keuls. Cada cifra es la media aritmética ± su DS. Céls: células. O3 = ozono. CuSO4 = sulfato cúprico. Rev Med Chile 2017; 145: 9-16


Enero 2017
To see the actual publication please follow the link above