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Abril_2107

ARTÍCULO DE INVESTIGACIÓN 420 Subclasificación molecular del cáncer colorrectal - A. M. Wielandt et al Rev Med Chile 2017; 145: 419-430 formulado por Vogelstein4 para la secuencia adenoma carcinoma basado en la inestabilidad de diversos genes ha evolucionado5. Hoy en día, se ha determinado que el CCR es una enfermedad heterogénea y surge por la acumulación secuencial de procesos genéticos y epigenéticos6,7. Se ha descrito que el CCR esporádico se desarrolla principalmente por 3 eventos moleculares carcinogénicos: la inestabilidad cromosómica (CIN), la inestabilidad microsatelital (MSI) y el fenotipo metilador (CIMP)8. El mecanismo CIN ocurre en 65%-70% de los casos de CCR esporádico. Permite identificar ganancias o pérdidas cromosomales y rearreglos estructurales que promueven la carcinogénesis a través de la pérdida de genes supresores de tumores o aumento en el número de copias de protooncogenes. Una de las formas de evaluarla es mediante la pérdida de heterocigosidad (LOH). La vía CIN ha sido propuesta como marcador predictivo en pacientes con etapas II y III9,10. La MSI es causada por la incapacidad de la célula cancerosa en corregir deleciones o inserciones en regiones repetitivas del ADN por el complejo de reparación “mismatch repair” (MMR). Los defectos del complejo MMR (dMMR) se deben a mutaciones o deleciones en los genes que lo conforman o la hipermetilación en la región promotora del gen MLH1. Se observa en aproximadamente 15%- 20% de los casos de CCR esporádicos y se asocia a buen pronóstico11,12. La vía CIMP se caracteriza por una amplia hipermetilación de los islotes CpG en los promotores de genes supresores de tumores, provocando la inactivación de ellos. Se presenta en 15%-20% de CCR esporádicos y se le asocia a mal pronóstico13,14. Debido a la heterogeneidad y complejidad de los tumores, diversos estudios han propuesto subgrupos moleculares de CCR basados en las 3 vías antes descritas15-19. Los esfuerzos en determinar el perfil molecular de CCR tienen como fin comprender mejor los mecanismos que determinan el comportamiento clínico de los diferentes tumores y, de esta manera, identificar biomarcadores que proporcionen información pronóstica precoz. En base a ello, se podrá confeccionar un tratamiento personalizado a los pacientes, con el fin de mejorar su sobrevida. La subtipificación de CCR más reciente se realizó por un grupo de especialistas de varios países, que constituyeron The Colorectal Cancer Subtyping Consortium (CRCSC), en el año 2015, donde se logró identificar 4 subtipos moleculares por consenso definidos en CMS 1 a 4, según las características clínico-patológicas, vías moleculares involucradas y estado mutacional de los genes KRAS, BRAF y PI3KCA, con el fin de favorecer el tratamiento clínico19. Cabe notar que en ese estudio, 21% de los tumores no lograron ser categorizados en estos cuatro subtipos. Dada la falta de subclasificación de nuestra población, se propuso realizar un estudio exploratorio del perfil molecular de las vías carcinogénicas CIN, MSI y CIMP en pacientes con CCR esporádico sometidos a cirugía en Clínica Las Condes para determinar la prevalencia de estos 4 subtipos. Materiales y Métodos Diseño del estudio Se realizó un estudio analítico exploratorio prospectivo de 53 pacientes sometidos a cirugía por neoplasias colorrectales entre los años 2010 y 2016 en Clínica Las Condes (Figura 1). Los criterios de inclusión correspondieron a pacientes tratados por neoplasias colorrectales sin terapia neoadyuvante; como criterios de exclusión se consideraron pacientes con enfermedad inflamatoria, síndromes hereditarios de CCR o tratados previamente con radio/quimioterapia. Cada paciente firmó un consentimiento informado previamente aprobado por el Comité de Bioética de Clínica Las Condes. A partir de los datos disponibles de la ficha clínica de los pacientes, se elaboró una base de datos con características demográficas y clínico patológicas (Tabla 1). Extracción de ADN La extracción de ADN genómico normal se realizó a partir de una muestra de sangre venosa periférica por método Lahiri20. El ADN tumoral se extrajo mediante el kit de extracción QIAmp DNA FFPE Tissue de QIAGEN (Hilden, Alemania), a partir de secciones de tejido tumoral fijado en formalina y embebido en parafina (FFPE); se seleccionaron áreas de la muestra con células tumorales ≥ 80%. La integridad del ADN se verificó mediante reacción en cadena polimerasa (PCR) multiplex.


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